Mécanismes de défense hémocytaires chez Mytilus edulis‎ : interactions avec Vibrio Splendidus sp. et modulation du phénotype MXR par les contaminants environnementaux

Résumé : Mytilus edulis est un mollusque bivalve de grand intérêt économique et écotoxicologique. Cette espèce sentinelle est connue pour sa résistance aux contaminants chimiques et biologiques. Néanmoins, depuis quelques années la moule bleue est touchée par des mortalités dans les élevages des Pertuis Charentais ayant pour dénominateur commun la présence de bactéries virulentes de type Vibrio. Le premier axe de cette thèse décrit les interactions des isolats de V. Splendidus avec la moule bleue au niveau cellulaire et physiologique. Les infections expérimentales ont permis la sélection de deux isolats bactériens affiliés à V. splendidus/V. hemicentroti : une souche virulente codée 10/068 1T1 et une souche inoffensive codée 12/056 M24T1. Ces deux bactéries ont été marquées à la GFP et validées en tant que modèles authentiques d’exposition à travers leurs caractéristiques de croissance et de virulence. Par ailleurs, V. hemicentroti 10/068 1T1 est capable d’altérer différentes fonctions hémocytaires incluant la motilité, l’adhésion, l’internalisation, la production de ROS, la maturation du phagosome et la viabilité contrairement à la bactérie non virulente. Les produits extracellulaires bactériens semblent être toxiques et inhibent certaines réponses cellulaires (internalisation et production de ROS). Enfin, nous avons reproduis avec succès l’infection des animaux par le pathogène via un modèle expérimental de cohabitation. Le suivi de l’infection montre que V. hemicentroti 10/068 1T1 a pour cible principale les branchies. Le deuxième axe explore le fonctionnement du système MXR (MultiXenobiotic Resistance) chez la moule bleue. La séquence codante complète d’un nouveau transporteur ABCG2 a été établie et la protéine résultante a été identifiée. La caractérisation moléculaire montre la présence du transcrit dans les hémocytes ainsi que dans les branchies et son homologie avec les autres protéines appartenant à diverses espèces. L’utilisation des sondes fluorescentes bodipy prazosin et pheophorbide A, combinées avec des bloqueurs spécifiques, démontre l’activité d’efflux de ce transporteur et son hétérogénéité dans les tissus et cellules. Par ailleurs, il est également démontré que l’expression des trois transporteurs ABC (abcb, abcc, abcg2) identifiés chez la moule bleue est modulée par les contaminants chimiques. Les animaux exposés au BaP au laboratoire ou prélevés sur un terrain contaminé montrent une surexpression des transcrits abc dans les branchies et une sous expression dans les hémocytes. La saisonnalité, sur le terrain, a également un effet sur les niveaux des transcrits et interfère avec les réponses liées aux contaminants. Seul le transporteur abcb exprimé dans les branchies n’est pas affecté par des variations saisonnières et montre une surexpression dans le site contaminé tout au long de l’année. En conclusion, nos résultats démontrent la vulnérabilité de la moule bleue face un pathogène. L'impact immunotoxique des xénobiotiques et le rôle que peuvent jouer les transporteurs ABC dans le fonctionnement du système immunitaire des moules reste à explorer.
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Thèse
Autre [q-bio.OT]. Normandie Université, 2017. Français. 〈NNT : 2017NORMLH01〉
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Soumis le : jeudi 8 février 2018 - 01:01:20
Dernière modification le : mardi 5 juin 2018 - 10:14:39
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Yosra Ben Cheikh. Mécanismes de défense hémocytaires chez Mytilus edulis‎ : interactions avec Vibrio Splendidus sp. et modulation du phénotype MXR par les contaminants environnementaux. Autre [q-bio.OT]. Normandie Université, 2017. Français. 〈NNT : 2017NORMLH01〉. 〈tel-01703593〉

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